葡萄牙国王塞巴斯蒂昂一世在非洲战死后，并未留下继承人，最后只能由他的叔爷爷恩里克继承王位。

因为恩里克是主教，教皇又是哈布斯堡家族，坚持让恩里克遵守誓言，不允许他娶妻生子，所以恩里克至死还是没有子嗣。

于是，剩下继承权的只有安娜的母亲，拉甘萨女公爵卡塔琳娜和安东尼奥阿什维、西班牙国王腓力二世。

按照西方王位继承人顺序，先男后女做法，安东尼奥阿什维是安娜外公次子的私生子，私生子是不会被正统皇室承认的，腓力二世与安娜性质一样，都是外孙，但是安娜的母亲王位继承人序列是在腓力二世之上的，若非因为西班牙强大压力，卡塔琳娜女公爵应该继承葡萄牙王位，安娜也就成了葡萄牙的女王。

腓力二世是哈布斯堡家族继承人，拥有强大实力，卡塔琳娜被迫放弃王位继承，安东尼奥阿什维贵族又不支持，争吵良久也没个结果，腓力二世一恼怒直接发兵吞了葡萄牙。

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